2011年12月29日—賽默飛世爾科技近期推出ThermoScientificFermentasFastDigest快速酶,是為快速DNA酶切專(zhuān)門(mén)研發(fā)的進(jìn)階版限制性?xún)?nèi)切酶。在30年的內(nèi)切酶研究當(dāng)中,我們積累的限制性?xún)?nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫(kù)是業(yè)內(nèi)最大的限制性?xún)?nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫(kù)之一。大量可供選擇的同裂酶和優(yōu)異的生產(chǎn)能力促進(jìn)了這個(gè)包含176種FastDigest快酶的獨(dú)特系統(tǒng)的誕生。
所有FastDigest快速酶在通用的FastDigest緩沖液和FastDigestGreen綠色緩沖液中都具有100%活性,并可在5-15分鐘內(nèi)迅速完成酶切。這就使得任意限制酶組合都能夠在同一反應(yīng)管中同時(shí)反應(yīng),避免了連續(xù)酶切。此外,F(xiàn)astDigestGreen綠色緩沖液兼具上樣緩沖液的功能,可直接將反應(yīng)物上樣凝膠電泳,操作更為便利。
FastDigest快速酶可用于酶切質(zhì)粒、基因組DNA、病毒DNA以及PCR產(chǎn)物。酶切時(shí)間和實(shí)驗(yàn)方案已經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,每種快速酶及其作用的模板都有相應(yīng)的酶切時(shí)間和實(shí)驗(yàn)方案提供。FastDigest系列尤其適合對(duì)于反應(yīng)組分純度、性能穩(wěn)定性和反應(yīng)體系配制簡(jiǎn)單化要求極高的應(yīng)用。
特點(diǎn)
所有FastDigest快酶在通用緩沖液中都具有100%活性
5-15分鐘完全酶切
FastDigest通用緩沖液與所有下游應(yīng)用100%兼容
直接上樣凝膠電泳
共有176種FastDigest快酶可供選擇
應(yīng)用
快速克隆分析
快速制備克隆用DNA
PCR產(chǎn)物酶切
快速RFLP基因分型
難切割DNA片段的酶切
FastDigest通用緩沖液與所有下游應(yīng)用100%兼容
DNA/RNA修飾酶在FastDigest緩沖液和
FastDigestGreen綠色
緩沖液中的活性
DNAPolymeraseI,E.coli100%
KlenowFragment100%
KlenowFragment,exo100%
T7DNAPolymerase100%
T4DNALigase*75-100%
FastAPTMThermosensitiveAlkalinePhosphatase100%
T4PolynucleotideKinase100%
*T4DNA連接酶活性需要0.5mMATP
通用緩沖液和直接凝膠上樣
所有FastDigest快酶在FastDigestGreen綠色緩沖液中都具有100%活性。此外FastDigestGreen綠色緩沖液中還包含密度試劑和兩種示蹤染料,從而可直接將反應(yīng)產(chǎn)物添加到點(diǎn)樣孔中。藍(lán)色染料在1%瓊脂糖凝膠
中的遷移率與3-5kbDNA片段接近,并在424nm時(shí)出現(xiàn)激發(fā)峰;而黃色染料在1%瓊脂糖凝膠中的遷移速度稍快于10bpDNA片段,在615nm時(shí)出現(xiàn)激發(fā)峰。
FastDigestGreen綠色緩沖液和無(wú)色緩沖液一樣可進(jìn)行高性能的DNA酶切和下游應(yīng)用。對(duì)于需要用熒光激發(fā)進(jìn)行酶切產(chǎn)物分析的應(yīng)用(例如,在紫外光下測(cè)量濃度),我們建議使用無(wú)色的FastDigest緩沖液。
FastDigestGreen綠色緩沖液
含有FastDigestGreen綠色緩沖液的反應(yīng)混合物
A:電泳前,加入點(diǎn)樣孔中的反應(yīng)混合物;B:電泳后,在凝膠中得到分離的條帶
用FastDigest快速酶在FastDigestGreen綠色緩沖液中5分鐘內(nèi)進(jìn)行質(zhì)粒DNA的三重酶切和連接
M:ThermoScientificFermentasGeneRulerExpressDNALadder(#SM1551)
C:未酶切的質(zhì)粒DNA對(duì)照
1:在FastDigest緩沖液中用FastDigestEcoRI、FastDigestKpnI和FastDigestSmaI對(duì)質(zhì)粒DNA進(jìn)行三重酶切;2:在FastDigest緩沖液中的酶切和連接反應(yīng)混合物
3:在FastDigestGreen綠色緩沖液中用FastDigestEcoRI、FastDigestKpnI和FastDigestSmaI對(duì)質(zhì)粒DNA進(jìn)行三重酶切;4:在FastDigestGreen綠色緩沖液中的酶切和連接反應(yīng)混合物
5分鐘內(nèi)酶切DNA
在1種緩沖液中5-15分鐘內(nèi)可進(jìn)行雙重和多重酶切
高通量應(yīng)用的理想選擇
所有種類(lèi)的DNA模板都提供相應(yīng)的酶切時(shí)間:質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA
任何模板都不需要酶切過(guò)夜
沒(méi)有星活性——無(wú)需延長(zhǎng)孵育時(shí)間
用FastDigest酶和傳統(tǒng)內(nèi)切酶進(jìn)行質(zhì)粒DNA酶切的比較
M:GeneRulerTM1kbPlusDNALadder;C:未酶切的質(zhì)粒DNA
1:用FastDigestXhol5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA;2:用FastDigestApaI5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA
3:用FastDigestXhol和FastDigestApaI5分鐘內(nèi)雙酶切質(zhì)粒DNA;4:用Apal酶切質(zhì)粒DNA1小時(shí)
5:用Xhol酶切質(zhì)粒DNA1小時(shí);6:在1XTango緩沖液中用4倍的ApaI過(guò)量酶切質(zhì)粒DNA1小時(shí),然后在2XTango緩沖液中用XhoI再酶切1小時(shí)
雙酶切可節(jié)省超過(guò)2個(gè)小時(shí)
FastDigest限制性?xún)?nèi)切酶為DNA酶建立新的標(biāo)準(zhǔn)
業(yè)內(nèi)領(lǐng)先的生產(chǎn)工藝
●所有生產(chǎn)均在符合歐盟指令和ISPE規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)的D級(jí)潔凈空間內(nèi)進(jìn)行
●嚴(yán)格的質(zhì)控
●依照ISO9001質(zhì)量管理體系和ISO14001環(huán)境管理體系運(yùn)作,確保產(chǎn)品均一性和批間重復(fù)性
●IVD產(chǎn)品生產(chǎn)符合ISO13845醫(yī)療器械管理體系標(biāo)準(zhǔn)
●根據(jù)要求進(jìn)行cGMP生產(chǎn)
業(yè)內(nèi)領(lǐng)先的生產(chǎn)工藝
FastDigest限制性?xún)?nèi)切酶應(yīng)用視頻:http://v.youku.com/v_show/id_XMzM3MDAxMTcy.html
如需更多信息請(qǐng)登錄:www.thermoscientific.com/fastdigest
關(guān)于賽默飛世爾科技
賽默飛世爾科技(紐約證交所代碼:TMO)是科學(xué)服務(wù)領(lǐng)域的世界領(lǐng)導(dǎo)者。我們致力于幫助我們的客戶(hù)使世界更健康、更清潔、更安全。公司年銷(xiāo)售額接近110億美元,擁有員工約37000人。主要客戶(hù)類(lèi)型包括:醫(yī)藥和生物技術(shù)公司、醫(yī)院和臨床診斷實(shí)驗(yàn)室、大學(xué)、科研院所和政府機(jī)構(gòu),以及環(huán)境與工業(yè)過(guò)程控制行業(yè)。借助于ThermoScientific和FisherScientific兩個(gè)首要品牌,我們將持續(xù)技術(shù)創(chuàng)新與最便捷的采購(gòu)方案相結(jié)合,為我們的客戶(hù)、股東和員工創(chuàng)造價(jià)值。我們的產(chǎn)品和服務(wù)有助于加速科學(xué)探索的步伐,幫助客戶(hù)解決在分析領(lǐng)域所遇到的各種挑戰(zhàn),無(wú)論是復(fù)雜的研究項(xiàng)目還是常規(guī)檢測(cè)或工業(yè)現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用。欲了解更多信息,請(qǐng)瀏覽公司網(wǎng)站:www.thermofisher.com或www.thermofisher.cn(中文)。