近日,青島農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院教授楊建明團(tuán)隊(duì)在微生物傳感器領(lǐng)域取得重要進(jìn)展,相關(guān)研究成果發(fā)表在國(guó)際生物傳感器領(lǐng)域期刊Biosensor and Bioelectronics。
乙醛廣泛存在于環(huán)境中,尤其是食品和大氣中,具有致癌性,是對(duì)人類健康的潛在威脅,因此急需開發(fā)一個(gè)快速、準(zhǔn)確的乙醛檢測(cè)技術(shù)。迄今為止,色譜法和傳感器常被用于乙醛濃度的檢測(cè)。色譜法雖然靈敏度高,然而復(fù)雜的衍生化前處理程序和漫長(zhǎng)的檢測(cè)過程極大限制了其在乙醛實(shí)時(shí)檢測(cè)中的應(yīng)用;生物傳感器具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、穩(wěn)定性好、性價(jià)比高等特點(diǎn),但目前研發(fā)的乙醛生物傳感器靈敏度和特異性較差,不能滿足實(shí)際樣品檢測(cè)的需求。
基于乙醛脫氫酶(AldDH)細(xì)菌表面展示系統(tǒng),楊建明團(tuán)隊(duì)開發(fā)出一種乙醛光學(xué)微生物傳感器,其檢測(cè)原理是AldDH催化乙醛生成乙酸,同時(shí)輔酶NAD+還原為NADH,產(chǎn)物NADH在340nm處有特征吸收峰,因此,在一定范圍內(nèi),隨著乙醛濃度的增加,340nm處的吸光度逐漸升高。
據(jù)介紹,該研究通過免疫熒光分析證實(shí)了AldDH在細(xì)菌表面的精確位置,并從外源蛋白表達(dá)條件以及全細(xì)胞催化劑反應(yīng)條件方面對(duì)該微生物傳感器進(jìn)行優(yōu)化,獲得一個(gè)高靈敏度的乙醛微生物傳感器。該微生物傳感器可在1~300μM范圍內(nèi)對(duì)乙醛進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)限可達(dá)0.33μM,對(duì)乙醛具有底物特異性,對(duì)其他的醛、糖、醇、酸類都無響應(yīng),且具有很好的穩(wěn)定性。
利用所開發(fā)的微生物傳感器對(duì)實(shí)際樣品中的乙醛濃度進(jìn)行檢測(cè),通過傳統(tǒng)的GC-MS方法充分證明了該微生物傳感器檢測(cè)乙醛的準(zhǔn)確性和可靠性。
該研究開發(fā)的乙醛微生物傳感器具有簡(jiǎn)單、快速、成本低、靈敏度高、特異性高等特點(diǎn),具有非常廣闊的應(yīng)用前景。