近日，經(jīng)過(guò)兩個(gè)多月的漫長(zhǎng)等待，一份特殊的"親子鑒定"報(bào)告出爐，13頭克隆小豬與"代孕"母親無(wú)血緣關(guān)系，僅與供體細(xì)胞存在"親子關(guān)系"。這從醫(yī)學(xué)上證明了，世界首例機(jī)器人操作的體細(xì)胞克隆豬在中國(guó)天津誕生。

經(jīng)過(guò)110天孕育，4月26日、29日，兩頭普通的"代孕"母豬先后順利產(chǎn)下了13頭健康的純種小長(zhǎng)白豬。較之以往"手工操作"克隆技術(shù)，此次機(jī)器人的自動(dòng)化"操刀"，用力更小，對(duì)細(xì)胞傷害更少，更高精度的操作將體細(xì)胞克隆技術(shù)成功的關(guān)鍵指標(biāo)"囊胚率"從10%提高至20%。這一數(shù)據(jù)令全球同行驚訝不已。

"機(jī)器人操作體細(xì)胞克隆豬"研究來(lái)自南開(kāi)大學(xué)機(jī)器人所趙新教授領(lǐng)導(dǎo)的跨學(xué)科研究團(tuán)隊(duì)，天津市畜牧獸醫(yī)研究所是主要合作單位。南開(kāi)大學(xué)機(jī)器人所研發(fā)多年的"面向生物醫(yī)學(xué)工程的微操作機(jī)器人系統(tǒng)"，曾獲2002年度國(guó)家技術(shù)發(fā)明二等獎(jiǎng)。此次克隆豬的誕生，也是時(shí)隔15年后，該技術(shù)獲得的又一重大突破。

體細(xì)胞克隆是改良生物品種的經(jīng)典方法之一。它將普通品種卵母細(xì)胞的細(xì)胞核去除后，注入優(yōu)良品種的體細(xì)胞。這種方法的優(yōu)勢(shì)在于獲得的后代一定是優(yōu)良品種。然而，成功率極低，成為體細(xì)胞克隆技術(shù)發(fā)展的瓶頸。

"作為最復(fù)雜的微操作之一，體細(xì)胞克隆技術(shù)急需實(shí)現(xiàn)機(jī)器人化。通過(guò)機(jī)器人化體細(xì)胞核移植操作，提高后續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)成功率，進(jìn)而提高整個(gè)體細(xì)胞克隆技術(shù)的成功率，是我們面臨的真正挑戰(zhàn)。"趙新說(shuō)。

針對(duì)上述問(wèn)題，南開(kāi)大學(xué)研究團(tuán)隊(duì)面向生命科學(xué)發(fā)展需求展開(kāi)科研攻關(guān)，研制出具有可視化、微創(chuàng)化、定點(diǎn)化、定量化功能，集檢測(cè)分析與操作于一體的原位顯微分析與操作儀，利用該儀器實(shí)現(xiàn)了機(jī)器人化的細(xì)胞核移植流程。

據(jù)介紹，基于機(jī)器人微操作的體細(xì)胞克隆技術(shù)的關(guān)鍵難點(diǎn)在于，如何最大限度地減少對(duì)細(xì)胞的傷害。南開(kāi)大學(xué)團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)并實(shí)現(xiàn)了機(jī)器人化的細(xì)胞核移植流程，包括卵母細(xì)胞撥動(dòng)尋找極體、抽核和體細(xì)胞注入三部分。

科研人員通過(guò)分析微操作工具與細(xì)胞接觸過(guò)程中的細(xì)胞受力情況，分別實(shí)現(xiàn)了基于最小力的細(xì)胞撥動(dòng)與抽核，保證了細(xì)胞核移植操作過(guò)程中細(xì)胞受力最小。"手動(dòng)操作撥動(dòng)細(xì)胞，細(xì)胞最大變形30至40微米，經(jīng)過(guò)計(jì)算后的機(jī)器人操作細(xì)胞最大變形降低至10到15微米。如果以往的力度是'一記重拳'，那么現(xiàn)在就是'輕輕一推'。"趙新介紹，該微操作系統(tǒng)采用基于平衡壓模型的操作，也讓抽取細(xì)胞核的過(guò)程更加"可控""溫柔"。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，基于最小力的細(xì)胞撥動(dòng)方法顯著減少了對(duì)細(xì)胞的傷害;后續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)表明，與人工操作相比，基于最小力的細(xì)胞抽核操作，細(xì)胞后續(xù)發(fā)育率顯著更高。

"最令人興奮的是，在體外實(shí)驗(yàn)中我們采用這套微操作平臺(tái)對(duì)53個(gè)卵母細(xì)胞進(jìn)行核移植，其中11個(gè)重構(gòu)胚發(fā)育成為標(biāo)志著克隆成功的囊胚，發(fā)育率達(dá)到21%。而此前體細(xì)胞克隆的囊胚率始終維持在10%左右。"趙新說(shuō)。

為了讓這項(xiàng)技術(shù)"開(kāi)花結(jié)果"，南開(kāi)大學(xué)科研團(tuán)隊(duì)，將該核移植方法應(yīng)用于整個(gè)克隆豬流程，先后完成了數(shù)千例核移植操作，來(lái)驗(yàn)證方法的有效性。2017年1月初，分四批完成了510例核移植操作，并將這510枚克隆胚胎移植到6頭母豬體內(nèi)。最終，兩頭母豬順利受孕，并與4月26、29日分別產(chǎn)下7頭、6頭，共計(jì)13頭健康的克隆豬。

"我們的研究第一次從細(xì)胞的發(fā)育角度指導(dǎo)微操作，通過(guò)細(xì)胞受力將微操作過(guò)程與細(xì)胞發(fā)育結(jié)果建立聯(lián)系。這套方法的推廣可進(jìn)一步提高微操作技術(shù)對(duì)整體生物過(guò)程的貢獻(xiàn)。可以預(yù)見(jiàn)，在輔助生育、動(dòng)植物品種改良以及大眾醫(yī)療、家畜生產(chǎn)等領(lǐng)域具有很好的應(yīng)用前景。"趙新說(shuō)。

據(jù)了解，該項(xiàng)目獲得國(guó)家重大科研儀器研制專項(xiàng)、"863"計(jì)劃先進(jìn)制造領(lǐng)域、天津市智能機(jī)器人重大科技專項(xiàng)支持。(張道正吳軍輝)

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